真菌毒素檢測(cè)儀基于不同的檢測(cè)技術(shù),主要有酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、膠體金免疫層析法、熒光定量免疫層析法、液相色譜法(HPLC)等,以下為你詳細(xì)介紹:
酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)
原理:利用抗原與抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)。將已知的真菌毒素抗原包被在微孔板上,加入待測(cè)樣品,如果樣品中含有相應(yīng)的真菌毒素,就會(huì)與包被抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性抗體。再加入酶標(biāo)記的二抗,它與已結(jié)合抗原的抗體發(fā)生反應(yīng)。最后加入酶的底物,酶催化底物顯色,顏色的深淺與樣品中真菌毒素的含量成反比。通過測(cè)定吸光度值,與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比,即可計(jì)算出樣品中真菌毒素的含量。
膠體金免疫層析法
原理:以膠體金作為示蹤標(biāo)志物,應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)。在硝酸纖維素膜上的檢測(cè)區(qū)(T線)和控制區(qū)(C線)分別包被相應(yīng)的抗原或抗體。當(dāng)樣品滴加到樣品墊上后,通過毛細(xì)作用向前移動(dòng),與膠體金標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合。如果樣品中含有真菌毒素,會(huì)與膠體金標(biāo)記抗體結(jié)合形成復(fù)合物,繼續(xù)向前移動(dòng)到檢測(cè)區(qū)時(shí),由于真菌毒素已與抗體結(jié)合,無(wú)法與檢測(cè)區(qū)包被的抗原結(jié)合,因此檢測(cè)區(qū)不顯色或顯色較淺;而控制區(qū)無(wú)論樣品中是否含有真菌毒素,都會(huì)與膠體金標(biāo)記抗體的另一部分結(jié)合而顯色。通過觀察檢測(cè)區(qū)和控制區(qū)的顯色情況,可以定性或半定量判斷樣品中真菌毒素的含量。
熒光定量免疫層析法
原理:與膠體金免疫層析法類似,但使用熒光物質(zhì)作為標(biāo)記物。當(dāng)樣品中的真菌毒素與熒光標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合后,在特定波長(zhǎng)的激發(fā)光照射下,熒光物質(zhì)會(huì)發(fā)出熒光。熒光信號(hào)的強(qiáng)度與樣品中真菌毒素的含量成正比。通過檢測(cè)熒光信號(hào)的強(qiáng)度,并結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)真菌毒素的定量檢測(cè)。
液相色譜法(HPLC)
原理:利用不同物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)不同,從而實(shí)現(xiàn)分離。樣品中的真菌毒素在流動(dòng)相的攜帶下,通過裝有固定相的色譜柱,各種真菌毒素在色譜柱中的保留時(shí)間不同,依次被分離出來(lái)。然后通過檢測(cè)器檢測(cè)分離后的真菌毒素,根據(jù)峰面積或峰高與標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行對(duì)比,計(jì)算出樣品中真菌毒素的含量。
真菌毒素檢測(cè)儀的優(yōu)點(diǎn):
節(jié)省時(shí)間:相比傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法,能夠在短時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè)。例如,膠體金免疫層析法和熒光定量免疫層析法通常在幾分鐘到十幾分鐘內(nèi)就可以得出檢測(cè)結(jié)果,大大縮短了檢測(cè)周期,提高了檢測(cè)效率。
適應(yīng)大規(guī)模檢測(cè):快速檢測(cè)的特點(diǎn)使得真菌毒素檢測(cè)儀適用于大規(guī)模樣品的篩查,如糧食收購(gòu)、食品加工等環(huán)節(jié),能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題,避免不合格產(chǎn)品流入市場(chǎng)。
無(wú)需專業(yè)培訓(xùn):操作簡(jiǎn)單,不需要復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)技能和專業(yè)知識(shí)。操作人員只需按照說(shuō)明書進(jìn)行簡(jiǎn)單的樣品處理和儀器操作,即可完成檢測(cè)。
便于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè):由于其操作簡(jiǎn)便,可以方便地?cái)y帶到現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行檢測(cè),如農(nóng)田、倉(cāng)庫(kù)、超市等,實(shí)現(xiàn)了現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè),及時(shí)掌握樣品中真菌毒素的污染情況。
高靈敏度和特異性:檢測(cè)技術(shù)使得真菌毒素檢測(cè)儀具有較高的靈敏度和特異性,能夠準(zhǔn)確檢測(cè)出樣品中微量的真菌毒素,并且能夠區(qū)分不同的真菌毒素種類,避免了假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果的出現(xiàn)。